建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株

• 作者: 夏焱 方建培 苏浩彬 郭海霞 陈纯 马国川 黄绍良
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Tet-on系统 XIAP相关因子1(Xaf1) 凋亡 肿瘤 诱导细胞株
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 528-532
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 4086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2005.05.011

摘要

[目的]为探索XIAP相关因子1(Xaf1)调节肿瘤细胞凋亡的机制,利用基因开关调节系统(Teton),拟建立由doxycycline调控表达的Xaf1诱导细胞株.[方法]将pTREHA-Xaf1和pWZL-Hyg质粒用基因转染技术转入稳定表达rtTA的Saos-2细胞中.经过hygromycin的抗性筛选,挑出并扩增表达Xaf1的细胞株.在8例实验组中加入doxycycline,和不加doxycycline的8例对照组比较,重复3次实验用免疫印迹法和免疫荧光显微镜检测doxycycline对Xaf1表达的调控.Xaf1诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示.[结果]在30个抗hygromycin的细胞株中,免疫印迹法筛选出5个明显由doxycycline调控诱导表达Xaf1的细胞株,免疫荧光显微镜检测显示doxycycline诱导Xaf1表达于细胞核内.流式细胞检测Xaf1于8h开始诱导Saos细胞凋亡,凋亡率最高约20%,而且不影响细胞周期.[结论]Xaf1-Saos诱导细胞株是研究Xaf1调节肿瘤细胞凋亡机制的良好细胞模型;Xaf1是一种核蛋白,能独立诱导肿瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方建培	中山大学附属第二医院儿科	208	778	13.0	16.0
2	陈纯	中山大学附属第二医院儿科	121	507	11.0	15.0
3	黄绍良	中山大学附属第二医院儿科	148	897	15.0	19.0
4	夏焱	中山大学附属第二医院儿科	35	239	9.0	13.0
5	郭海霞	中山大学附属第二医院儿科	64	231	8.0	11.0
6	马国川		11	120	7.0	10.0
7	苏浩彬	中山大学附属第二医院儿科	62	342	10.0	15.0