SARS冠状病毒核衣壳蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 丁天兵 任君萍 徐志凯 王平 王海涛 薛小平 雷迎峰 黄庆生
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 核衣壳蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 50-52
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2594字
• 语种: 中文

摘要

目的: 表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N蛋白), 并以表达产物为免疫原制备特异性单克隆抗体(mAb).方法: 采用RT-PCR方法, 从灭活的病毒抗原标本中扩增编码N蛋白的基因.测序确认后, 再亚克隆至原核表达载体中.从SDS-PAGE凝胶中回收原核表达产物后免疫BALB/c小鼠, 经融合、筛选制备特异性mAb.结果: 从标本中扩增出1 269 bp的DNA, 测序结果证实为N蛋白基因. 将该基因克隆至原核表达载体中后, 在大肠杆菌中获得了较好的表达.表达产物经SDS-PAGE后, 在Mr约为43 000处可见1条明显的诱导表达带.Western blot的结果表明, 该电泳带与SARS患者的恢复期血清呈特异的免疫反应.从SDS-PAGE凝胶中回收表达产物并免疫BALB/c小鼠, 制备出3株抗N蛋白的mAb.这些mAb与SDS-PAGE凝胶上Mr约为43 000的蛋白带也呈现很强的免疫反应.结论: 所获的重组N蛋白及特异性mAb, 将为进一步建立SARS病毒感染早期诊断的方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄庆生	第四军医大学微生物学教研室	8	53	4.0	7.0
2	任君萍	第四军医大学微生物学教研室	18	51	5.0	6.0
3	雷迎峰	第四军医大学微生物学教研室	60	194	7.0	10.0
4	丁天兵	第四军医大学微生物学教研室	32	161	7.0	11.0
5	王平	第四军医大学微生物学教研室	12	35	4.0	5.0
6	薛小平	第四军医大学微生物学教研室	27	202	8.0	13.0
7	王海涛	第四军医大学微生物学教研室	28	97	6.0	8.0