NGAL基因3'端序列转录调控元件的克隆与鉴定

• 作者: 丘碧波 吴梦峰 李恩民 牛永东 许丽艳 邱文冰 黄丽娜
• 来源期刊: 肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 载体蛋白质类/遗传学 克隆,分子 食管肿瘤/遗传学 食管肿瘤/病理学 基因表达调控 荧光素类
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 前沿报道
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: Q784|R735.1
• 字数: 3990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5269.2005.01.002

摘要

目的:将不同长度的NGAL基因3'端序列(包括外显子、内含子和部分3'侧翼非翻译序列)克隆到pGL3-Promoter(pGLP)载体中,通过检测报告基因荧光素酶活力,确认NGAL 3'端序列中是否含有增强子或抑制子元件.方法:应用PCR技术从SHEEC细胞基因组DNA中扩增出不同长度的NGAL基因片段F5(1 880 bp)和F7(826 bp),将其克隆到pGEM-T easy载体,并测序验证;再亚克隆到pGL3-Promoter载体中,获得pGLP-F5和pGLP-F7表达载体;将pGLP-F5和pGLP-F7载体分别与pRL-TK载体共转染HeLa、EC109和Vero细胞,通过检测相对荧光素酶活力,确认这些NGAL基因片段中是否含有增强子元件.结果:我们成功构建了pGLP-F5和pGLP-F7重组载体.Hela、EC109和Vero转染细胞与pGL3-Promoter相比,酶活力未表现出明显的增强或减弱.结论:在本研究的实验条件下,NGAL基因F5和F7片段内潜在的顺式作用元件并没有发挥作用,或作用不明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许丽艳	汕头大学医学院肿瘤病理研究室	76	528	13.0	19.0
2	牛永东	汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室	18	140	8.0	11.0
3	邱文冰	汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室	7	29	4.0	5.0
4	丘碧波	汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室	4	17	3.0	4.0
5	黄丽娜	汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室	2	10	2.0	2.0
6	吴梦峰	汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室	2	10	2.0	2.0
7	李恩民		1	5	1.0	1.0