斯氏按蚊丝氨酸蛋白酶基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

• 作者: 杨松 段建华 黄复生
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 斯氏按蚊 约氏疟原虫 丝氨酸蛋白酶 黑化 RT-PCR 原位核酸分子杂交
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1059-1063
• 页数: 5页
• 分类号: R382.31
• 字数: 4443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.12.007

摘要

目的克隆斯氏按蚊丝氨酸蛋白酶基因,分析该分子与约氏疟原虫卵囊黑化关系.方法根据其它昆虫丝氨酸蛋白酶的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊cDNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm(T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定,根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下丝氨酸蛋白酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析.结果获得了2种斯氏按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶cDNA部分序列,即AsSP1(448bp)和AsSP2(472bp),分别与冈比亚按蚊SP2A和大劣按蚊SP2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含保守的丝氨酸蛋白酶催化功能域.在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血细胞有AsSP1和AsSP2 mRNA表达.结论 AsSP1和AsSP2很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关,推测可能是斯氏按蚊的前酚氧化酶的活化酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄复生	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	91	437	10.0	17.0
2	段建华	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	63	183	7.0	10.0