人Noggin基因神经细胞特异性表达载体的构建

• 作者: 刘黎青 周盛年 姜昊 魏先森
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Noggin alpha1-微管蛋白 基因 启动子 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 806-808
• 页数: 3页
• 分类号: R394.3
• 字数: 2521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2005.07.036

摘要

目的构建具有神经细胞表达特异性的人Noggin基因的真核表达载体,进一步研究Noggin基因在神经系统发育成熟、功能机制方面的作用.方法根据人Noggin基因的cDNA序列,设计合成一对5' 端分别含有HindⅢ和XbaⅠ酶切位点的特异性引物,运用RT-PCR方法克隆人Noggin基因的cDNA序列;回收PCR产物,并将其与pMD18 simple T 载体连接,进行HindⅢ和XbaⅠ双酶切鉴定和DNA测序鉴定;真核表达载体pCS2+[Tα1]-GFP带有神经细胞特异性启动子(alpha1-微管蛋白启动子),用HindⅢ和XbaⅠ双酶切后琼脂糖凝胶电泳回收带有特异性启动子的片断和T载体上人Noggin基因,在T4 DNA连接酶作用下将二者连接,并筛选鉴定.结果 RT-PCR 产物含有人Noggin基因,DNA测序结果显示重组的pMD18-Noggin载体中含有正确的人Noggin基因序列,重组的pCS2+[Tα1] -Noggin载体中含有人Noggin基因的cDNA序列以及alpha1-微管蛋白启动子.结论成功构建了人Noggin基因的神经细胞特异性真核表达载体pCS2+[Tα1]-Noggin.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周盛年	山东大学齐鲁医院神经内科	92	626	12.0	21.0
2	魏先森	山东大学齐鲁医院神经内科	5	6	2.0	2.0
3	刘黎青		63	472	10.0	20.0
4	姜昊	山东省泰山疗养院一科	5	16	2.0	4.0