人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的克隆及原核表达

• 作者: 侯周华 傅蕾 彭仕芳 李萍 谭德明
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人可溶性肿瘤病坏死因子受体1 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 868-870
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2005.07.002

摘要

目的构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的重组质粒,进行原核表达.方法以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFR1全编码区基因片段,构建含有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质粒菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对重组蛋白进行分析.结果经核苷酸序列测序和SDS-PAGE法鉴定,成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌,并表达和纯化了sTNFR-MBP融合蛋白.结论成功地构建了人sTNFR1重组质粒克隆,表达并纯化了sTNFR1-MBP融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅蕾	中南大学湘雅医院感染病科	17	47	4.0	5.0
2	谭德明	中南大学湘雅医院感染病科	209	1471	20.0	28.0
3	侯周华	中南大学湘雅医院感染病科	42	269	9.0	15.0
4	彭仕芳	中南大学湘雅医院感染病科	32	123	6.0	9.0
5	李萍	中南大学湘雅医院感染病科	75	425	11.0	16.0