多联实时荧光PCR定量方法检测四种肠道细菌的研究

• 作者: 彭雁忠 李瑜 林镜中 肖性龙 贾宏 邹虹 黄君美 黄胜中
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 空肠弯曲菌 肠出血性大肠杆菌O157:H7 副溶血性弧菌 单核细胞增生李斯特菌 多联 荧光PCR
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 943-947
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2
• 字数: 4123字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2005.05.006

摘要

目的建立一种能同时检测空肠弯曲菌(CJ)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7、副溶血性弧菌(VP)和单核增生李斯特菌(LM)的多联实时荧光PCR定量方法. 方法根据CJ的C基因序列、EHECO157:H7的RFBE基因序列、VP的toxR基因序列和LM的iap基因序列的开放阅读框(ORF),分别利用ABI pBIprimer experess 2.0和DNAStar中的Primer Select软件设计出了数对特异性的引物和探针,筛选出最佳的各组引物和探针组合,对引物、探针的浓度、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,从而建立了检测临床标本中CJ、O157:H7、VP和LM的多联荧光PCR反应体系和检测方法.结果实验显示该方法具有特异性强,灵敏度高,均达到100copies/ml. 结论多联实时荧光PCR方法可定量检测临床标本中CJ、O157:H7、VP和LM,该法快速简便,准确高效,有利于上述病原菌所致疾病的早期诊断和治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭雁忠		58	194	7.0	10.0
2	肖性龙		9	89	4.0	9.0
3	李瑜		16	109	6.0	10.0
4	贾宏		27	228	9.0	14.0
5	邹虹		13	71	4.0	8.0
6	黄君美		6	43	3.0	6.0
7	黄胜中		2	30	2.0	2.0
8	林镜中		2	30	2.0	2.0