低氧反应元件调控下h-VEGF165基因表达及其蛋白产物的延迟消失

• 作者: 张中明 张宜乾 董红燕 闫英群
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮生长因子 低氧反应元件 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 281-286
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 字数: 3694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0371-0874.2006.03.013

摘要

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转基因可促进心肌缺血区血管生成,改善心脏功能,然而长期高水平表达又会引起诸多副作用.为调控VEGF表达,在启动子区加入低氧反应元件(hypoxic response element,HRE)作为调控开关,研究氧环境对VEGF基因mRNA及蛋白产物表达的影响.重组腺相关病毒(recombinant adeno-associ-ated virus,rAAV)作为载体(rAAV-HRE-h-VEGF165),转染离体培养大鼠心肌细胞,在常氧/缺氧(氧浓度1%)/缺氧复氧条件下进行培养,用酶联免疫特异性测定(enzymelinkedimmunosorbent assay,ELISA)方法检测培养液h-VEGF165蛋白浓度,细胞免疫荧光染色观测细胞内h-VEGF165蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测细胞h-VEGF165 mRNA表达.结果显示:未转染组、常氧培养组均无h-VEGF165mRNA及其蛋白表达;缺氧培养组h-VEGF165mRNA及蛋白均表达;缺氧复氧4 h组的h-VEGF165mRNA消失,培养液中h-VEGF165蛋白减少,细胞内h-VEGF165蛋白存在;缺氧复氧8 h及12 h组的h-VEGF165mRNA消失,培养液和细胞内h-VEGF165蛋白均消失.研究表明,在HRE调控下,缺氧可促使h-VEGF165基因表达,复氧后,h-VEGF165mRNA表达停止,蛋白产物延迟消失.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董红燕	徐州医学院神经生物研究中心	68	200	7.0	10.0
2	张宜乾	徐州医学院附属医院胸心外科	21	68	5.0	7.0
3	张中明	徐州医学院附属医院胸心外科	91	190	7.0	9.0
4	闫英群	徐州医学院附属医院胸心外科	3	17	2.0	3.0