低氧诱导人VEGF基因表达载体的构建及其蛋白表达检测

• 作者: 何丽明 武文琦 殷爱红 郑少鹏
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子 低氧反应元件 真核表达载体 血管内皮细胞生长因子
• 年，卷（期）: 2011,（52）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 48-50
• 分类号: R346
• 字数: 2271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.52.025

摘要

目的 以人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因的低氧反应元件(HRE)作为增强子,构建含HRE的真核表达载体,探讨含HRE不同拷贝数的载体对低氧的反应状态.方法 将人工合成的HRE串联后与CMV启动子连接,替换pcDNA3.1的启动子部分,构建成低氧诱导真核表达载体；将hVEGF基因重组到此载体中,转染BHK细胞.用免疫组化染色法检测VEGF的表达,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测低氧前后细胞hVEGF表达的变化.结果 成功构建了含HRE的低氧诱导真核表达载体4HRE-pcDNA-VEGF和6HRE-pcDNA-VEGF.转染细胞后进行低氧培养,VEGF的表达均增高,含6HRE的低氧诱导作用高于4HRE.结论 在含HRE的真核表达载体中,低氧时可诱导基因的表达,其拷贝数可影响诱导作用的强度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑少鹏		21	40	4.0	5.0
2	武文琦		16	44	4.0	5.0
3	殷爱红		14	26	3.0	3.0
4	何丽明		2	2	1.0	1.0