基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157:H7和霍乱弧菌O139

• 作者: 徐晓静 文思远 王升启 王华 陈苏红 马学恩
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因芯片 多重PCR 大肠杆菌O157:H7 霍乱弧菌O139
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 122-126,130
• 页数: 6页
• 分类号: Q503
• 字数: 4470字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.02.006

摘要

目的:建立一种同时快速检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7和霍乱弧菌O139的基因芯片,并验证该芯片的特异性和敏感性.方法:选择EHEC O157:H7的产志贺样毒素基因stx1、stx2和β-葡糖醛酸糖苷酶基因(uidA);霍乱弧菌O139的肠毒素A亚单位(ctxA)、毒力协调菌毛A亚单位(tcpA)、糖基转移酶(glycosotransferase LPSgt)基因序列分别设计引物和探针,反向引物用荧光素Cy3标记,探针在3′端氨基修饰.在优化的PCR和杂交反应条件下,分别进行三重PCR扩增,产物混合后与芯片进行杂交,产生特异性荧光信号,进一步筛选探针.随后将筛选出的探针制备芯片用于检测临床样本.结果:PCR产物在相应探针处均产生特异性杂交信号,临床样本检测结果表明,此芯片比常规细菌学检测方法灵敏.结论:所研制的同时定性检测EHEC O157:H7和霍乱弧菌O139的基因芯片是特异、灵敏而且快速的,为这两种肠道致病菌感染的快速诊断提供了新的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
2	王华	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	68	439	13.0	17.0
3	马学恩	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	87	464	11.0	17.0
4	文思远	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	32	312	10.0	16.0
5	陈苏红	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	44	306	9.0	15.0
6	徐晓静	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	16	87	6.0	9.0