抗出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘奇 姚楚铮 徐建国 徐海燕 景怀奇 杨书豪 王伟 田素娟
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体 脂多糖 胶体金 免疫层析
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 963-965
• 页数: 3页
• 分类号: R516.3
• 字数: 2785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.11.012

摘要

目的制备抗出血性大肠杆菌O157:H7 (E.coli O157:H7)特异性单克隆抗体(MAbs).方法福尔马林灭活的E.coli O157:H7免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术建立分泌抗E.coli O157:H7 MAbs的杂交瘤细胞株,对配对较好的6株 MAbs用ELISA法测定其免疫球蛋白类及亚类,用ELISA法、凝集法和Western blot鉴定 MAbs的特异性.结果 6株 MAbs免疫球蛋白均为小鼠IgM.这些 MAbs均能与27个E.coli O157:H7菌株发生凝集反应,与部分弗劳地杆菌发生凝集反应,与11株鼠伤寒沙门氏菌、7株伤寒杆菌、2株痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、出血性大肠杆菌O26:H11和O111、肠集聚性大肠杆菌、42株非定血清型大肠杆菌、霍乱弧菌O1群和O139群不发生凝集反应;ELISA结果显示6株 MAbs与粪链球菌、变形杆菌、粘质沙雷氏菌、肺炎克雷伯杆菌均无交叉反应;ELISA和Western blot结果显示,3株 MAbs针对E.coli O157:H77酚相脂多糖.结论 6株 MAbs具有较高的特异性,有可能用于制备检测E.coli O157:H7的病原检测试剂.