大血藤ISSR-PCR反应体系的建立

• 作者: 李钧敏 蔡琰琳 金则新
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大血藤 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 583-586
• 页数: 4页
• 分类号: Q948.1
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2006.04.022

摘要

采用改进的SDS法抽提大血藤基因组DNA,分析了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、Taq DNA 聚合酶量和BSA浓度对大血藤ISSR-PCR扩增结果的影响,建立了稳定的、可重复的大血藤ISSR最佳反应体系:10 μL PCR 反应体积中, 4×Taq 酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl, pH9.0,50 mmol/L KCl , 1 g/L Triton X-100),0.5U Taq DNA聚合酶,2 mmol/L MgCl2,0.1 mmol/L dNTP,12 pmol 引物,10 ng 模板 DNA,2 mg/mL牛血清白蛋白.大血藤的最适退火温度为52.4 ℃.