穗花杉ISSR引物反应条件的优化与筛选

• 作者: 朱柏芳 朱笃 李思光 邓荣根
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: ISSR 引物筛选 穗花杉
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 页码范围: 318-322
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 3784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5102.2006.03.014

摘要

在研究穗花杉(Amentotaxus aragotaenia)的遗传多样性过程中,为了获得清晰、重复性好ISSR扩增结果,对影响ISSR-PCR的多个因素包括模板浓度、Taq酶的选择和用量、Mg2+和dNTPs浓度及退火温度等指标等进行了筛选和优化,确定了穗花杉ISSR-PCR分析的最适扩增条件:20 μL PCR反应体系中,2 μL 10×Taq酶配套缓冲液,1.8 U Taq聚合酶(上海生工公司),0.2 μmol·L-1引物,0.18 mmol·L-1 dNTP,1.5～2.5 mmol·L-1 MgCl2,10 ng·μL-1模板DNA.用来自不同居群7个个体,以100个ISSR引物进行PCR扩增,筛选出扩增效果较好的10个引物.得到了92个位点,其中45个多态性位点,多态性位点比例为49%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李思光	南昌大学生物工程系	59	849	17.0	27.0