高原鼠兔ISSR引物反应体系的优化与筛选

• 作者: 唐利洲 慈海鑫 林恭华 苏建平 葛艳丽
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 高原鼠兔 ISSR 优化PCR
• 年，卷（期）: 2008,（33）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 14422-14424,14430
• 页数: 4页
• 分类号: S813.3
• 字数: 3201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.33.029

摘要

[目的]筛选和优化高原鼠兔(Ochotona curzoniae)适宜的ISSR反应体系,以在对高原鼠兔进行ISSR分析时获得清晰和多态性好的扩增结果.[方法]以高原鼠兔基因组DNA为模板,通过单因素试验,对体系中的模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物用量、退火温度进行探讨.[结果]结果表明,高原鼠兔ISSR-PCR扩增的最佳条件为:25 μl PCR反应体系,其中4 μl DNA 模板,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1.25 U Taq聚合酶,1.5 μmol/L引物,复性温度45~60 ℃(退火温度随引物不同而确定).用11条引物进行了PCR扩增,筛选出效果较好的6条引物.[结论]该反应体系的建立为鼠兔遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林恭华		30	111	6.0	8.0
2	慈海鑫	中国科学院高原生物适应与进化重点实验室中国科学院西北高原生物研究所	8	117	4.0	8.0
6	葛艳丽	中国科学院高原生物适应与进化重点实验室中国科学院西北高原生物研究所	1	2	1.0	1.0
10	唐利洲	中国科学院高原生物适应与进化重点实验室中国科学院西北高原生物研究所	4	25	3.0	4.0