油橄榄ISSR-PCR反应体系优化与引物筛选

• 作者: 宁德鲁 李勇杰 李瑞 毛云玲 陈少瑜
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 油橄榄 基因组DNA 体系优化 引物筛选
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 5797-5799
• 分类号: S565|TQ644.1
• 字数: 2983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.10.028

摘要

[目的]对油橄榄ISSR-PCR反应体系进行优化,并筛选出多态性ISSR引物.[方法]以油橄榄嫩叶片提取的基因组DNA为模板,通过单因子试验针对反应体系主要因子Mg2+、dNTPs、引物浓度及模板用量进行油橄榄ISSR-PCR反应体系优化.[结果]优化的油橄榄ISSR-PCR反应体系为:总体系20μl中含1×Taq Buffer,3.5 mmol/L Mg2+,0.4 mmol/L dNTPs,1.0 μmol/L引物,1.0 U Taq DNA聚合酶,20ng DNA模板.反应程序为:94℃预变性5 min；94℃变性30s,52 ～55℃退火30 s,72℃延伸2 min,40个循环；72℃延伸10 min,4℃保存.同时利用上述反应体系和反应程序筛选出了扩增稳定、多态性高、扩增条带清晰的ISSR引物11条.[结论]为进一步油橄榄种质资源的多样性研究和品种鉴定奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁德鲁	云南省林业科学院经济林研究所	182	1087	17.0	25.0
2	李勇杰	云南省林业科学院经济林研究所	45	269	10.0	14.0
3	陈少瑜		2	19	2.0	2.0
4	李瑞		1	11	1.0	1.0