问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB2和fliR的克隆及原核表达系统的构建

• 作者: 严杰 王欣莹 范洪学
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 问号钩端螺旋体 鞭毛相关基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-7,11
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2006.01.002

摘要

目的克隆问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB2和fliR,并构建其原核表达载体.方法按常规苯酚-氯仿法提取问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组DNA,高保真PCR扩增flhA、flhB2和fliR基因片段,T-A克隆后测序,构建原核表达载体,采用SDS-PAGE和免疫印迹法检测目的融合蛋白的表达.结果问号钩体56601株flhA、flhB2和fliR基因扩增片段的核苷酸序列与报道的相应序列同源性分别为100%、99.9%和99.9%,氨基酸序列同源性分别为100%、99.8%和100%.所构建的重组原核表达系统在IPTG的诱导下,能有效地表达目的融合蛋白Trx-FlhA、Trx-FlhB2和Trx-FliR,产量约为细菌总蛋白的10%.结论已成功构建了问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB2和fliR原核表达系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	范洪学	吉林大学公共卫生学院	57	328	11.0	15.0
3	王欣莹	吉林大学公共卫生学院	2	16	1.0	2.0