猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘燕玲 宋志军 宋长绪 张福良 朱道中 杨增岐 林志雄 武占银 蒋智勇
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒 实时定量RT-PCR TaqMan荧光探针
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 98-102
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q503
• 字数: 3263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.02.004

摘要

根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比.结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达5.0×100拷贝/μL,比常规RT-PCR灵敏度高100倍.用该方法对东莞、增城、湛江等地的猪血清和多种组织样品进行了检测.结果,该方法与常规RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%.用该方法对3份不同的组织样品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要.