肾癌G250抗原基因真核表达载体的构建和序列测定

• 作者: 刘晓华 张亚东 徐霖 曹开源 李晓飞 肖娜 袁广卿
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 癌 G250/MN/CAIX抗原 逆转录-聚合酶链式反应 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2378字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1000-6702.2006.01.003

摘要

目的构建肾癌G250抗原基因编码区序列的真核表达载体并进行序列测定.方法从肾癌组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列,将PCR片段定向克隆至真核表达载体pcDNA3.0,并进行序列测定. 结果肾癌组织RT-PCR扩增后,均产生特异性条带,位置在1000 bp和1600 bp之间,与预定相符.pcDNA3.0-G250分别用HindⅢ、Xho I双酶切后产生2条带,均与预定位置相符;抗原基因编码区序列与Genbank登录号BC014950文献报道的序列同源性为100%,目的基因与载体正确连接.结论成功克隆了肾癌G250抗原的基因编码区序列,并构建了其真核表达载体pcDNA3.0-G250,为核素标记的G250单克隆抗体在诊断和治疗的应用及G250基因修饰的树突状细胞疫苗的肾癌生物治疗提供了依据.