抗肾细胞癌异种化G250抗原基因疫苗的构建及真核表达

• 作者: 于继云 张亮 李韧 田仁礼 董金凯 贾锐 阎谨琦 韩刚 高江平
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 疫苗,DNA 基因表达 G250/MN/CA
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 191-193
• 页数: 3页
• 分类号: R737.11
• 字数: 2364字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250主要T细胞表位区域、猴和鼠G250部分片段区域融合基因tG250的真核表达质粒,并在猴肾COS7细胞中表达.方法:通过基因合成和PCR技术构建人、猴和鼠G250区域融合基因tG250,将其插入含有人Igκ链前导信号肽(sig)、人IgG-Fc和糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定信号肽融合基因序列的细胞膜锚定修饰真核表达载体pCI-Fc-GPI中;将重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI转染COS7细胞,流式细胞仪和免疫荧光检测其表达情况.结果: tG250融合基因经测序正确,PCR和酶切鉴定证明已成功连入真核表达载体pCI-Fc-tG250-GPI中;流式细胞仪和免疫荧光检测显示,重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI在COS7细胞中得到很好的表达.结论:成功构建了重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI,且在COS7细胞中可以有效表达,为以G250抗原为靶点基因疫苗的后续功能研究打下良好基础.