小鼠端粒酶蛋白亚单位真核表达载体的构建和序列测定

• 作者: 冯炼强 姜楠 易慧敏 易述红 李华 杨扬 汪根树 蔡常洁 许赤 陆敏强 陈规划
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 端粒,末端转移酶 寡核苷酸序列分析 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 851-855
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.05.005

摘要

目的:克隆小鼠端粒酶蛋白亚单位(mTERT)的cDNA,构建真核表达载体并进行序列测定.方法:从肝癌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,并进行序列测定.结果:获得mTERT编码区3 369bp的cDNA片段,用PCR和限制性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pAC-mTERT.通过对mTERT编码区cDNA序列测序证实其与GenBank中的已知序列一致.结论:成功克隆了mTERT编码区序列,并构建了其真核表达载体,为以TERT为基础的肿瘤生物治疗奠定基础.