SARS病毒S蛋白编码基因表达载体的构建及在Vero细胞中的表达

• 作者: 周瑞祥 黄茂
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 传染性非典型肺炎 冠状病毒 S蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 2843字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006

摘要

目的构建含SARS病毒S蛋白编码基因片段的表达载体,并将其置于Vero细胞中表达.方法设计1对PCR引物,在其下游引入Flag序列,通过PCR方法从质粒pGEX-6P-1-SARS-S中扩增出S蛋白编码基因, PCR产物经酶切后,插入表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-SARS-S.重组质粒经酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析后转染Vero细胞,用抗Flag单克隆抗体通过Western blot检测S蛋白片段在Vero细胞中的表达.结果酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析示重组质粒构建完全正确;Western blot证实重组S蛋白片段能够在Vero细胞表达.结论融合Flag序列的SARS病毒S蛋白片段在Vero细胞中获得了正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄茂		226	1516	18.0	28.0