MAS-PCR法快速诊断分析Leber's遗传性视神经病变原发性致病突变位点

• 作者: 朱益华 林宇岚 林建银 童绎 阳菊华 陈贻锴
• 来源期刊: 眼视光学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Leber's遗传性视神经病变 脱氧核糖核酸,线粒体 等位基因特异性多重PCR 基因诊断
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: Leber's遗传性视神经病变研究
• 页码范围: 349-351,355
• 页数: 4页
• 分类号: R774.6
• 字数: 3002字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2006.06.002

摘要

目的 探索一种简易、快速、高效的临床基因诊断分析原发性Leber's遗传性视神经病变(Leber's hereditary optic neuropathy,LHON)位点的新方法.方法 根据已知的LHON患者线粒体DNA上的3个原发性LHON致病突变位点(G11778A、T14484C和G3460A),设计3条突变位点特异性聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)引物,直接以全血样为模板的等位基因特异性多重PCR(multiplex allelespecific polymerase chain reaction,MAS-PCR)分析3个原发性LHON致病突变位点.以此方法检测24例确诊的LHON患者,其中18例为线粒体DNA G11778A突变,4例为T14484C突变,2例为G3460A突变;同时,以20份正常血样标本作阴性对照.结果 优化的MAS-PCR条件为94℃/3 min,94℃/30 s、59.8℃/30 s、72℃/30 s,30个循环,72℃/3 min;以此方法检测了44份血样标本,其结果与预期结果一致,表明利用该方法筛查3个原发性LHON致病突变位点是可行的.同时,混和血液样本模拟实验结果显示,该方法可检测含多个原发性LHON致病突变位点的血液样本,且整个分析过程只需约2 h.结论 该方法直接以全血样作为PCR的模板,不需从血样中纯化DNA;单管一次性行PCR,可同时筛查3个原发性LHON致病突变位点.因此,该方法具有快速、高效、费用低、特异性好以及只需微量血液样本等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林建银	福建医科大学分子医学研究中心	125	908	16.0	23.0
2	童绎	福建医科大学第一附属医院眼科	83	258	9.0	11.0
3	林宇岚	福建医科大学医药生物工程中心	27	195	9.0	13.0
4	陈贻锴	福建医科大学医药生物工程中心	22	144	8.0	11.0
5	阳菊华	福建医科大学医药生物工程中心	18	48	4.0	5.0
6	朱益华	福建医科大学第一附属医院眼科	49	138	6.0	8.0