具有多种剪接形式的RNA结合蛋白基因的克隆、表达及其细胞内定位

• 作者: 叶棋浓 孙琰 张浩
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: RBPMS 克隆 基因表达 细胞内定位
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 106-108,112
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R737.9
• 字数: 3901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.02.002

摘要

目的:构建具有多种剪接形式的RNA结合蛋白(RBPMS)基因的真核表达载体,并在真核细胞中进行表达,确定RBPMS在细胞中的定位.方法:采用PCR技术,从人卵巢文库中扩增RBPMS基因的完整编码序列,将所扩增基因克隆到带FLAG标签的真核表达载体上,转染人胚肾细胞293T,Western印迹鉴定RBPMS的表达.然后将所扩增基因克隆到带绿色荧光标签的pEGFP-C1表达载体上,转染乳癌细胞ZR75-1,观察RBPMS在细胞中的定位情况.结果:经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确,Western印迹实验证明RBPMS表达成功,通过激光共聚焦显微镜观察,RBPMS分布在胞质中,在40%～50%细胞中RBPMS呈聚集状分布.结论:成功构建了RBPMS基因的真核表达载体,该基因产物分布在胞质中,在40%～50%细胞中RBPMS呈聚集状分布.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张浩	军事医学科学院生物工程研究所	59	336	8.0	16.0
2	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
3	孙琰	军事医学科学院生物工程研究所	5	11	2.0	3.0