RPL30基因的克隆及其与神经管发育相关关系的研究

• 作者: 于丽 李少玲 管英俊 高英茂
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: cDNA文库 神经管 RPL30 SSS法筛选
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2006.01.005

摘要

本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系.提取胚胎(E)8.5 d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库.利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库.将得到的RPL30阳性噬菌斑进行质粒转化、酶切鉴定及测序分析,进而回收、纯化RPL30 cDNA片段并制备探针.用Northern杂交技术检测神经管发育过程中RPL30 mRNA的表达状况.结果显示,构建的神经管cDNA文库容量为1.5×106 pfu/ml,重组率达到99%,平均插入片段长度大于1 kb.经过筛选得到含RPL30 cDNA的阳性克隆.序列测定及同源性分析发现,该cDNA片段全长535 bp,其中含有完整的开放阅读框.Northern杂交结果显示,在E8 d～E12 d各时间段,神经管中RPL30 mRNA的表达均处于较高水平,且随着时间的增长,表达量递增,于E12 d达到高峰.本文结果表明,我们用SSS技术结合PCR法从神经管cDNA文库中克隆到了RPL30基因的全长cDNA序列,该基因可能与神经管发育密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	管英俊	潍坊医学院组胚教研室	135	541	11.0	15.0
2	高英茂	山东大学医学院组胚教研室	93	674	14.0	20.0
3	李少玲	山东大学医学院组胚教研室	25	100	5.0	8.0
4	于丽	潍坊医学院组胚教研室	80	325	9.0	13.0