红千层ISSR反应体系的优化

• 作者: 何桥 李伟 梁国鲁 赵新成
• 来源期刊: 西南园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 红千层 ISSR 正交设计 梯度PCR
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S685
• 字数: 2800字
• 语种: 中文

摘要

以红千层(Callistemon rigidus R.Br.)的幼叶为材料,利用正交试验设计,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化筛选,研究了Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度5种因素对扩增结果的影响,同时研究了退火温度和循环次数对PCR扩增结果的影响.实验结果表明,在25μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别为:1×PCR buffer,2.5 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.4μmol/L引物,1.2 ng/μL模板DNA,0.5 U TaqDNA聚合酶.通过梯度PCR测验,适宜的退火温度为50℃,循环次数45次.并且在红千层ISSR分析中,带纹清晰,稳定性好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁国鲁	西南大学园艺园林学院	168	1619	20.0	30.0
2	何桥	西南大学园艺园林学院	39	373	10.0	18.0
3	李伟	西南大学园艺园林学院	45	217	7.0	13.0
4	赵新成	西南大学园艺园林学院	1	9	1.0	1.0