钾依赖钠钙交换蛋白- 6(SLC24A6)的基因克隆与蛋白表达

• 作者: 刘瑜 牟波 王宣春 胡仁明 陈凤玲
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钾依赖钠钙交换蛋白6 胰岛素瘤
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1041-1044
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.06.001

摘要

目的:克隆和表达钾依赖钠钙交换蛋白-6(SLC24A6)基因,为进一步阐明其与胰岛素分泌的关系奠定基础.方法:利用RT-PCR观察SLC24A6基因在胰岛素瘤和正常胰腺组织中的表达,并克隆SLC24A6基因全长,将SLC24A6基因构建到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌ROSSET菌(DE3)中诱导表达纯化;将SLC24A6基因构建到绿色荧光真核表达载体pEGFP-C3,利用共聚焦显微镜观察SLC24A6在小鼠胰岛素瘤β-TC3细胞中的定位.结果:SLC24A6基因在胰岛素瘤组织表达明显高于正常胰腺;成功获得原核表达纯化蛋白,大小约80kD;重组载体pEGFP-C3-SLC24A6转染后,定位于小鼠胰岛素瘤β-TC3细胞膜上.结论:SLC4A6可能与胰岛素分泌有关,SLC24A6全长原核表达为进一步研究SLC24A6的生物学功能和蛋白质晶体结构奠定了基础,SLC24A6在胰岛素瘤细胞的定位为进一步阐明其与胰岛素分泌的关系提供了理论依据.