重组人肝再生增强因子的纯化及生物学活性分析

• 作者: 佟明华 傅泳航 孔祥平 易学瑞 曾平鲁 李茹冰 杨联萍 潘韵 王治伟 邹清雁
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人肝再生增强因子 层析 生物活性
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 治疗制品
• 页码范围: 505-508
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2006.05.022

摘要

目的 对在大肠杆菌中表达的重组人肝再生增强因子(rhALR)进行分离纯化及生物学活性分析.方法 以大肠杆菌DH5α发酵表达重组人肝再生增强因子,经包涵体洗涤、变性、目的蛋白复性,以离子交换、分子筛等技术纯化,并进行一系列检定.结果 目的 蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性及柱层析纯化,纯度大于98%,SDS-PAGE测定相对分子质量为30 000,MOLDI-TOF-MS测定其相对分子质量为30 780.522,N-末端15个氨基酸与理论序列一致.Western blot证实rhALR正确表达,等电点5.85～6.85,氨基酸含量与理论值基本符合.动物实验证实rhALR具有明显的促进CCl4毒性肝损伤小鼠肝细胞修复活性.结论 经柱层析纯化的rhALR具有促进小鼠CCl4肝损伤肝细胞修复的活性.