人类新基因flj20174的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探

• 作者: 丁红梅 刘朝晖 曹国军 李少华 杨光 沈倍奋 范明 邵宁生 陈留存 高亚萍
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: flj20174 基因表达 亚细胞定位 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 410-414
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.05.003

摘要

目的: 研究人类系统性RNAi相关基因flj20174的克隆表达、亚细胞定位和表达谱,以及功能的初步探索.方法:利用生物信息学方法分析、预测flj20174基因的表达谱和功能;采用RT-PCR技术,从健康人外周血单个核细胞cDNA中,扩增获得flj20174可能的全长编码区,并将其亚克隆于pEGFP-N1载体;利用Northern杂交鉴定其转录本;利用半定量PCR确定flj20174在免疫组织和免疫细胞中的表达谱;通过脂质体转染入HeLa细胞,观察融合蛋白的亚细胞定位和过表达对细胞状态的影响.结果与结论:获得了2 484 bp的全长编码区,测序后发现与NCBI公布的Ak00018的序列完全一致;Northern杂交证实其转录本约为4 669 bp;证实该基因属于低丰度基因,在免疫细胞中有相对较高的表达,并在B细胞和T细胞激活后表达量下降;与EGFP融合表达后可见该蛋白主要分布于内膜系统,而且过表达该融合蛋白可以引起细胞的死亡,推测此过程可能与机体的免疫防御相关.