DNA-PKcs短发夹RNA载体的构建及其表达

• 作者: 卢云萍 田晓予 翁丹慧 邢辉 陈刚 马丁
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: DNA-PKcs基因 短发夹RNA 真核表达载体 细胞增殖活性
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 642-645,700
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31
• 字数: 4006字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2006.09.007

摘要

目的 构建DNA-PKcsshRNA表达载体,观察该基因的抑制对A2780细胞增殖活性的影响.方法 将针对人DNA-PKcs基因的不同部位设计的shRNA插入到真核表达质粒并转染人卵巢A2780细胞,RT-PCR和WesterBlot检测其对该基因mRNA和蛋白水平的抑制效率,MTT法测定DNA-PKcs基因的抑制对肿瘤细胞增殖活性的影响.结果 DNA测序分析证实DNA-PKcs shRNA表达载体pSIRENDNA-PKcs shRNA构建成功并在细胞中表达,转染重组载体的A2780细胞DNA-PKcs的表达在mRNA和蛋白水平均明显下降;重组载体转染细胞增殖活性明显降低.结论 成功构建DNA-PKcs shRNA表达载体为进一步研究DNA损伤修复基因DNA-PKcs奠定了基础;DNA-PKcs表达的抑制可能会导致肿瘤细胞增殖活性降低.