Y-盒结合蛋白1短发夹环RNA真核表达载体的构建

• 作者: 周磊磊 唐华容 沈慧玲 秦茹娟 许文林
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 YB-1 短发夹环RNA U6SnRNA启动子
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 35-37,65
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 2597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2007.01.009

摘要

目的:构建Y-盒结合蛋白1(Y-box binding protein-1,YB-1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体.方法:采用人U6SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的YB-1靶序列的反向重复序列,置于pGensil-1质粒载体中,构建成YB-1短发夹环RNA,产生重组质粒pGensil-1/U6/YBX11,pGensil-1/U6/YBX12及pGensil-1/U6/YBX13.分别用Pst Ⅰ和Sal Ⅰ酶切鉴定;并将经酶切鉴定正确后的重组质粒作测序分析.结果:YB-1的特异性shRNA片段被成功克隆进pGensil-1质粒中,Sal Ⅰ酶切鉴定可切出400 bp大小的片段,DNA测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片断的序列完全一致.结论:成功构建了针对YB-1的特异性shRNA真核表达载体pGensil-1/U6/YBX11,pGensil-1/U6/YBX12及pGensil-1/U6/YBX13,为进一步研究其基因功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦茹娟	江苏大学附属人民医院中心实验室	9	40	4.0	6.0
2	许文林	江苏大学附属人民医院中心实验室	61	265	8.0	11.0
3	唐华容	江苏大学附属人民医院中心实验室	10	19	2.0	3.0
4	沈慧玲	江苏大学附属人民医院肿瘤科	26	81	5.0	6.0
5	周磊磊	江苏大学附属人民医院中心实验室	10	27	3.0	4.0