FPV 4b核心蛋白基因的克隆及其探针制备

• 作者: 冯立文 张学东 李文红 沈晓峰 郭建顺 金宁一
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡痘病毒 4b核心蛋白基因 克隆 基因探针
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 440-443
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659
• 字数: 3524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5684.2006.04.023

摘要

利用PCR方法成功克隆了FPV 4b核心蛋白基因1 361 bp片段.序列分析表明:该序列与模板DNA(AF198100)的碱基序列同源性为99.5%,只有7个碱基差异(第215位C→A,第386位T→A,第388位G→A,第1 014位T→G,第1 034位T→G,第1 137位C→T,第1 143位A→G).回收FPV 4b核心蛋白基因1 361 bp片段与pMD18-T载体相连构建重组质粒pMD18-T-4b,用EcoRⅠ酶切pMD18-T-4b后得到1个约360 bp大小的DNA片段,以其为模板制备了地高辛标记的DNA探针.对新标记的探针进行标记效率检测,结果显示其标记效率为100 mg/L.敏感性检测表明,该探针对同源DNA的检出限量为10 pg.特异性检测结果表明,用本试验所标记的探针对提取的FPV 282E4和FPV JL株DNA、重组质粒pMD 18-T-4b进行检测结果均呈阳性,而鸡马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、CEF的核酸提取物均呈阴性,说明该探针具有较强的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金宁一	军事医学科学院军事兽医研究所	87	502	10.0	18.0
2	郭建顺	吉林大学畜牧兽医学院	10	66	5.0	8.0
6	张学东	吉林大学畜牧兽医学院	11	38	3.0	6.0
7	冯立文	吉林大学畜牧兽医学院	6	38	4.0	6.0
8	沈晓峰	吉林大学畜牧兽医学院	5	31	3.0	5.0
9	李文红	军事医学科学院军事兽医研究所	1	0	0.0	0.0