VMP1基因的克隆及其抗体的制备与鉴定

• 作者: 李勤喜 谢琳娜
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: VMP1 表达 抗体制备 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（z1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 134-137
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2006.z1.033

摘要

为了得到效价高、特异性强、能用于检测内源性 VMP1 蛋白的抗体,采用RT-PCR 法,从L929细胞株中克隆鼠VMP1基因,重组入pCMV5载体,用 PCR 扩增与其氨基酸 132-239 区域对应的DNA片断,将该片段连接到原核表达载体 pGST parallel 中,在大肠杆菌 BL21 菌株中大量表达,经谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化后,得到高纯度的 VMP1抗原.免疫新西兰兔,获得抗 VMP1 蛋白的兔抗血清,将血清纯化后即得到抗 VMP1 的多克隆抗体.用 Western blot 分析手段检测了该抗体的特异性及效价.在用该抗体检测外源性和内源性 VMP1 蛋白的试验中,证实该抗体效价高,特异性强,效果很理想.此方法可用于获得大量廉价的抗 VMP1 蛋白的高滴度和高特异性的抗体,为进一步研究 VMP1 在细胞内,尤其是在信号转导通路中的功能和作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李勤喜	厦门大学生命科学学院	16	63	5.0	6.0
2	谢琳娜	厦门大学生命科学学院	2	9	1.0	2.0