IL-12基因不同亚基真核表达载体的构建及表达

• 作者: 张会东 李娅莎 郝牧 高蕾 鲍朗
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素12 SOEPCR 真核表达 瞬时转染
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 698-702
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 4703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2006.06.002

摘要

目的: 克隆并构建含人白介素12(hIL-12)基因p35、 p40不同亚基的真核表达载体, 瞬时转染真核细胞并诱导IL-12的表达.方法: 人单核细胞白血病细胞株(THP-1)和人白血病细胞株(HL-60), 经DMSO、 IFN-γ和LPS诱导后, 用RT-PCR及SOE PCR扩增IL-12 p40、 p35及p40-p35融合基因; 并构建pcDNA-p35、 pcDNA-p40及pcDNA-IL-12真核表达载体.以3种重组质粒分别瞬时转染COS-7细胞后, 通过RT-PCR及ELISA法检测目的基因的表达.结果: 经诱导后, 从HL-60细胞中扩增到IL-12 p40和p35基因片段; 但从THP-1细胞中只扩增到p35基因片段, 未能扩增到p40基因片段; 经酶切鉴定、 PCR扩增及序列测定表明pcDNA-p35、 pcDNA-p40及pcDNA-IL-12真核表达质粒构建成功; 并在COS-7细胞中可检测到IL-12的表达.结论: 含hIL-12基因不同亚基的真核表达质粒的成功构建, 对进一步研究IL-12在免疫应答中的调节作用以及作为免疫佐剂改善BCG免疫保护效果的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西医学中心基础与法医学院感染与免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	张会东	四川大学华西医学中心基础与法医学院感染与免疫研究室	42	109	6.0	8.0
3	高蕾	四川大学华西医学中心基础与法医学院感染与免疫研究室	12	57	4.0	7.0
4	郝牧	四川大学华西医学中心基础与法医学院感染与免疫研究室	7	33	3.0	5.0
5	李娅莎	四川大学华西医学中心基础与法医学院感染与免疫研究室	5	13	2.0	3.0