质粒DNA抗原芯片检测抗双链DNA抗体的初步研究

• 作者: 徐华 潘继红 王传玺 韩金祥 高雪芹 黄海燕
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物芯片 质粒DNA 抗双链DNA抗体
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 895-897
• 页数: 3页
• 分类号: Q789
• 字数: 2407字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.06.016

摘要

目的:建立以质粒DNA作为抗原的检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的芯片方法,并与酶联免疫吸附实验比较,初步探讨用芯片法检测抗dsDNA抗体的临床价值.方法:将原核表达载体质粒pcDNAⅡ用质粒DNA快速抽提试剂盒提取纯化DNA后按1∶2稀释,用点样仪点在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)修饰的玻片上,温孵后用含有1%小牛血清白蛋白和2.5%蔗糖的PBST封闭,以Cy3标记的人IgG为二抗,建立检测dsDNA抗体的芯片方法,并与德国欧蒙公司生产的抗双链DNA检测ELISA试剂盒做比较,对包括58例系统性红斑狼疮(SLE)、25例干燥综合征(SS)、10例皮肌炎(DM)和7例类风湿关节炎(RA)在内的病人和60例健康人对照进行了抗dsDNA的对比检测.结果:对阳性标本的检测,与现用常规检测方法ELISA相比,芯片检测抗dsDNA的灵敏度为91.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为89.3%,阴性预测值为92.5%;对健康对照的检测,2种方法均为阴性,符合率为100%.结论:与ELISA相比,用质粒DNA作为抗原建立的芯片方法的灵敏度和特异度较高,为今后建立同时检测多个自身抗体的芯片奠定了基础.