猪白介素家族重要基因的克隆、表达及其结构与功能预测分析

• 作者: 才学鹏 景志忠 窦永喜 罗启慧 蒙学莲 郑亚东 陈国华 骆学农
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪白介素 基因家族 同源性分析 结构预测
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 612-619
• 页数: 8页
• 分类号: S8
• 字数: 5488字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.03.026

摘要

[目的]克隆、表达和预测分析猪白介素家族重要成员的结构与功能.[方法]以猪白介素基因家族为对象,通过对猪PBMC刺激诱导,提取RNA,采用RT-PCR技术克隆IL-4、IL-6、IL-18等重要功能基因,并进行原核表达和结构与功能分析.[结果]成功地克隆和表达了IL-4、IL-6和IL-18基因,序列分析发现,克隆的基因与NCBI/GenBank上登载的参考序列的同源性分别为99.25%、99.21%和100%,与其它各物种的基因及其编码蛋白间具有较大的种属差异性;在大肠杆菌中表达的IL-4和IL-6重组蛋白具有较高的生物活性;结构预测表明,这些蛋白分子均含有较多的磷酸化修饰、糖基化修饰(除IL-6)、蛋白激酶以及信号传导结合位点,其中IL-4、IL-6蛋白分子的螺旋化程度较高,均在60%左右,水溶性较低,但这3种蛋白的立体空间结构均为致密的球状,说明该结构特征是其多种生物学功能发挥的基础.[结论]本研究成功地克隆、表达和分析了猪白介素家族的IL-4、IL-6和IL-18等重要分子的结构与功能,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础.