山羊表皮干细胞的分离培养及EGFP基因转染研究

• 作者: 刘大勇 杨学义 窦忠英
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 山羊 表皮干细胞 转染
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S827.1|Q813.1+1
• 字数: 4588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2006.08.001

摘要

采用组织块法和酶消化法对山羊表皮干细胞进行分离,对分离的表皮干细胞进行了免疫组化染色鉴定,并对其进行了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染研究.结果表明,2种方法均能得到山羊表皮干细胞,其中组织块培养法简单易行,组织块可重复利用,但原代细胞脱出时间较长,平均为8 d,且培养季节对细胞脱出时间、原代传代时间、传代数有显著影响;酶消化法周期短,8 d左右即可传代,不同培养季节对细胞克隆形成时间、细胞传代时间和传代数无显著影响,但处理过程繁琐.EGFP基因在转染表皮干细胞24 h后大量表达,转染率达20%～30%,72 h时转染强度最大,荧光可持续5周;转染使细胞增殖能力明显下降.