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摘要:
目的构建含有HIV-1核心蛋白gag基因的真核表达质粒,并研究其免疫应答反应.方法采用PCR方法从1例HIV感染者中扩增出gag基因,构建重组质粒pcDNA-GAG.接种小鼠后,检测其抗体及抗体亚类,并对小鼠的淋巴细胞亚群进行分析,采用3H-TdR法、ELISPOT方法和51Cr释放法分别检测T淋巴细胞的增殖反应性、特异性分泌IFN-γ的CD8+T淋巴细胞以及特异性CTL杀伤活性.结果重组质粒体外表达目的蛋白的相对分子质量(Mr)约为55×103.免疫小鼠后可诱导产生特异性抗体,其中IgG2a与IgG的比例显著高于IgG1与IgG的比例;T淋巴细胞体外经ConA刺激后SI达到160.67,显著高于对照组(14.04,P<0.05);产生IFN-γ的CD8+T淋巴细胞数目以及特异杀伤率均显著高于对照组小鼠(P<0.05).结论重组质粒pcDNA-GAG可诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应,而且ELISPOT方法检测特异性细胞免疫应答反应的结果与51Cr释放法一致,提示可用此法对DNA疫苗诱导的细胞免疫进行评价.
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文献信息
篇名 含HIV-1核心蛋白基因的重组质粒的构建及其免疫应答的研究
来源期刊 中华微生物学和免疫学杂志 学科 医学
关键词 HIV-1 核心蛋白 DNA疫苗 免疫应答 酶联免疫斑点法
年,卷(期) 2006,(5) 所属期刊栏目 感染免疫
研究方向 页码范围 433-437
页数 5页 分类号 R392
字数 4775字 语种 中文
DOI 10.3760/j:issn:0254-5101.2006.05.014
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王嘉玺 57 335 9.0 16.0
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HIV-1
核心蛋白
DNA疫苗
免疫应答
酶联免疫斑点法
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期刊影响力
中华微生物学和免疫学杂志
月刊
0254-5101
11-2309/R
大16开
北京市经济技术开发区经海二路38号
2-55
1981
chi
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