华支睾吸虫蛋白酶体β1新基因克隆与表达

• 作者: 余新炳 吴忠道 徐劲 朱佩娴 杨光 荆春霞
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 蛋白酶体 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1470-1472
• 页数: 3页
• 分类号: R383.2
• 字数: 2836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-0580.2006.12.033

摘要

目的 通过筛选华支睾吸虫cDNA文库发现蛋白酶体β1(CsPSMB1)新基因,表达其重组蛋白,为进一步研究CsPSMB1的功能及应用提供基础数据.方法 将插入于pBluscripetⅡSK(+)载体中的cDNA随机测序,发现CsPSMB1新基因.根据pGEX-4T-1的多克隆位点及CsPSMB1编码区序列设计引物,进行PCR扩增,双酶切后连接到pGEX-4T-1载体中.重组表达质粒pGEX-4T-1-CsPSMB1经PCR、双酶切及测序鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.结果 发现了编码PSMB1基因的一个新成员CsPSMB1,CsPSMB1全长749个核苷酸,编码一个217个氨基酸残基的蛋白,理论分子量为24kD,预测的蛋白与人的PSMB1蛋白同源性为50%并且含有一个蛋白酶体结构域.序列已经成功登录GeneBank,登录号为AY849971.构建成功重组质粒pGEX-4T-1-CsPSMB1,经IPTG诱导后表达出PSMB1的GST融合蛋白.结论 发现了华支睾吸虫新基因CsPSMB1,成功构建pGEX-4T-1-CsPSMB1重组表达载体并表达出了CsPSMB1的GST融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
3	徐劲	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
4	杨光	暨南大学医学院寄生虫学教研室	31	186	8.0	13.0
5	荆春霞	暨南大学医学院流行病学教研室	91	1611	22.0	37.0
6	朱佩娴	暨南大学医学院寄生虫学教研室	15	58	4.0	7.0