APE/Ref-1基因重组腺病毒的构建表达和鉴定

• 作者: 卓贤露 姜振东 张学渊 邓凤莲 魏运军
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 氧化还原因子-1 重组腺病毒 耳蜗螺旋神经节 氧化损伤
• 年，卷（期）: 2006,（16）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1694-1697
• 页数: 4页
• 分类号: Q513.1|Q782|Q764.35
• 字数: 3736字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.16.016

摘要

目的 构建表达氧化还原因子-1(APE/Ref-1)基因的复制缺陷型重组腺病毒,为进一步研究APE/Ref-1在耳蜗螺旋神经节氧化损伤病理过程中的作用机制提供实验基础.方法 应用RT-PCR 技术从大鼠脑组织总RNA克隆出APE/Ref-1 基因, 将APE/Ref-1 基因定向克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1 在大肠埃希菌BJ5183内同源重组后,转染293 细胞进行包装,并反复感染293细胞进行扩增.对其进行安全性、滴度以及活性等检测.采用Western blot 对APE/Ref-1蛋白表达进行检测和鉴定.结果 克隆出大鼠APE/Ref-1基因,经测序证实结果正确;得到高滴度的重组腺病毒,提取病毒DNA证实含目的基因.结论 成功构建了表达APE/Ref-1 的复制缺陷型重组腺病毒.为进一步研究APE/Ref-1在耳蜗螺旋神经节的氧化损伤过程中作用机制奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卓贤露	贵阳医学院附属医院耳鼻咽喉科	15	86	5.0	9.0
2	张学渊	第三军医大学西南医院耳鼻咽喉科	114	486	11.0	18.0
3	魏运军	第三军医大学西南医院耳鼻咽喉科	41	178	8.0	11.0
4	姜振东	第三军医大学西南医院耳鼻咽喉科	26	144	6.0	11.0
5	邓凤莲	重庆医科大学生物工程系	8	50	4.0	7.0