在Dystrophin基因大内含子上定位缺失突变位点的策略

• 作者: 张国忠 潘速跃 蔡丽丹 钟敏 陆兵勋
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肌营养不良,杜氏/遗传学 内含子 基因缺失
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 120-121
• 页数: 2页
• 分类号: R394.1
• 字数: 2869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.12.054

摘要

目的:探讨在Dystrophin基因大内含子上准确定位缺失突变位点的方法.方法:实验于2005-02/05南方医科大学南方医院神经内科实验室内完成.选择2例临床证实为男性假肥大型肌营养不良症患者,通过外显子聚合酶链反应检测证实其5'端断裂点分别位于Dystrophin基因庞大的44号和2号内含子.在44号和2号内含子上先各设计5对引物将内含子序列人为地分成长度大致均等的6个待查区域,经第一次聚合酶链反应检测确认断裂点所在区域后继续在该区域每3kb序列设计1对引物,在第2次聚合酶链反应步移法检测中若相邻2对内含子引物1对扩增出正常阳性结果而另1对扩增为阴性结果,即为内含子上断裂点的近似位置.结果:以5对初步定位引物进行聚合酶链反应检测后确定以上2例假肥大型肌营养不良症患者5'端断裂点位于44号内含子第5区和2号内含子第6区,在该2个区域进行第二次聚合酶链反应步移法检测,准确定位断裂点分别大致位于44号内含子178kb左右以及2号内含子153kb左右的位点处.结论:分次聚合酶链反应步移法定位Dystrophin基因大内含子上缺失突变位点的方法更为简便,对位于大内含子上基因缺失连接片段的准确快速克隆具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘速跃	南方医科大学南方医院神经内科	145	1160	16.0	25.0
2	陆兵勋	南方医科大学南方医院神经内科	140	1130	18.0	25.0
3	张国忠	南方医科大学南方医院神经内科	41	219	9.0	13.0
4	钟敏	南方医科大学南方医院神经内科	23	88	5.0	8.0
5	蔡丽丹	南方医科大学南方医院神经内科	10	50	4.0	7.0