冷暖型小麦基因差异的最佳RAPD反应体系研究

• 作者: 李京敬 王长发 裴国亮 陶士珩
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 冷型小麦 RAPD反应体系
• 年，卷（期）: 2006,（13）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 2993-2995
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3244字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.13.025

摘要

为了建立小麦RAPD反应的最佳体系,保证反应结果的稳定性和可靠性,寻找小麦冷暖型基因差异,降低试验成本,在相同PCR扩增程序(94 ℃预变性5 min,94 ℃变性45 s,38 ℃退火1 min,72 ℃延伸1.5 min,40个循环,72 ℃延伸10 min,4 ℃保存)下,对冷暖型小麦基因组DNA的RAPD扩增体系各参数进行比较筛选, 创建其最佳反应体系为:25 μl反应体系中,模板DNA 20 ng,10×PCR 缓冲液2.5 μl,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1 U,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,ddH2O 12 μl,随机引物10 ng.