输血传播病毒ORF2基因的克隆和原核表达

• 作者: 周旭 姜英 安静 白慕群
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 输血传播病毒 ORF 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 181-183,186
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.03.008

摘要

目的 克隆输血传播病毒(TTV)兰州株ORF2的基因,并构建原核表达载体.方法 通过巢式PCR,从一份兰州地区无偿献血员血清中扩增TTV病毒的ORF2基因,并克隆到pGEM-T载体中,进行核苷酸序列分析.然后亚克隆到高效表达质粒pET22b(+)中,构建表达载体ORF2-pET22,在大肠杆菌中诱导表达带有6个组氨酸标签的ORF2融合蛋白.用纯化的重组ORF2蛋白作为抗原,ELISA检测人血清样本中的TTV-IgG抗体.结果 ORF2基因与日本TA287株的同源性为99.3%.用TTV-PCR阳性的血清对重组蛋白进行了Western blot,结果在表达蛋白位置处出现了特异性反应条带.以ORF2蛋白为抗原的ELISA检测结果具有较好的准确性.结论 已成功克隆了ORF2基因,并在原核细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周旭	兰州生物制品研究所第二研究室	38	98	5.0	7.0
2	安静	兰州生物制品研究所第二研究室	13	38	3.0	5.0
3	白慕群	兰州生物制品研究所第二研究室	8	17	3.0	4.0
4	姜英	兰州生物制品研究所第二研究室	12	55	4.0	7.0