单细胞PCR用于HLA配型的研究

• 作者: 侯怀水 张乐玲 时庆 李栋 沈柏均 鞠秀丽
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 产前诊断 HLA抗原 单细胞 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 308-311
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-2727.2007.05.005

摘要

目的 研究用筑巢式多重PCR技术对单细胞进行HLA配型,分析影响单细胞PCR扩增的因素.方法 首先分别采用不同的细胞裂解方法制备单细胞DNA模板,然后采用多重PCR分别扩增HLA-A,B基因的第2、3外显子和第2内含子区域,HLA-DRB1基因的第2外显子区域,最后根据大量DNA的常规HLA分型结果对单细胞第1轮扩增产物进行第2轮筑巢式序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型.结果 酶解法制备单细胞DNA模板效率最高,第1轮扩增成功率为93.3%,而碱裂法和冻融法分别为83.3%和73.3%;采用酶解法制备单细胞DNA模板进行第2轮PCR-SSP分型验证,20份标本扩增成功率为95%,有3份标本只扩增出一条染色体,等位基因脱扣发生率为15%,全部操作可在6 h内完成.结论 筑巢式多重PCR技术对单细胞HLA分型具有较高的扩增效率,操作时间短,可望应用于妊娠前诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张乐玲	山东大学齐鲁儿童医院内科	14	62	5.0	7.0