嘌呤核苷磷酸化酶温敏型表达载体的构建、表达及应用于腺苷转化的研究

• 作者: 任大明 徐珠洁 李晓晖 梁胜华 蒋欣茵
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 嘌呤核苷磷酸化酶 pBV 220 肌苷 腺苷
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 409-413
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 字数: 3482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2340.2007.04.011

摘要

通过双酶切方法将重组质粒上大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因克隆到pBV220表达载体上,构建了温敏型PNPase的表达载体pBV 220-PNP,转化大肠杆菌DH5α并使之表达.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异表达条带,其分子量约为26 kDa.在此基础上研究了不同诱导条件对蛋白表达量的影响.分别以肌苷和尿苷为核糖供体研究重组菌转化腺苷的条件,发现肌苷最适合作为核糖供体,在30 mmol·L-1 pH 7.5的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液中,以30 mmol·L-1肌苷和10 mmol·L-1腺嘌呤作底物,加入0.5% 基因工程湿菌体60 ℃反应3 h,腺苷的转化率为85.57%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任大明	复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室	98	819	15.0	24.0
2	李晓晖	复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室	9	98	5.0	9.0
6	蒋欣茵	复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室	2	56	1.0	2.0
7	徐珠洁	上海水产大学食品学院	1	0	0.0	0.0
8	梁胜华	复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室	1	0	0.0	0.0