基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶条件的优化

• 作者: 刘宁 刘桂祯 梁剑锋 莫世艺 黄炯威
• 来源期刊: 中国药业
• 学科: 医学
• 关键词: 核苷磷酸化酶 基因工程菌 发酵 优化
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 药物研究
• 页码范围: 22-24
• 页数: 3页
• 分类号: R963|TQ460.38
• 字数: 2635字
• 语种: 中文

摘要

目的 优化核苷磷酸化酶(包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶)基因工程菌的发酵表达条件.方法 通过工程菌摇瓶培养,测定吸光度D值,考马斯亮蓝(Bradford)法测定蛋白,SDS-PAGE电泳和凝胶成像扫描分析表达量,优化表达条件;通过正交试验优化50 L发酵罐发酵条件.结果 摇瓶培养起始pH为7.0～7.2,于30℃培养4h,加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导8h后收获菌体,可得到较高的生物量和重组酶蛋白表达量.50 L发酵罐的最佳条件为起始pH为7.0～7.2,于32℃培养4h,加入终浓度为0.4 mmol/L的IPTG诱导9h后收获菌体,每升发酵液可得2 g以上的酶蛋白.结论 基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶产量较高,可工业化生产,为酶法合成核苷酸类似物的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宁	厦门大学生命科学院	7	13	2.0	3.0
2	刘桂祯		4	4	2.0	2.0
3	黄炯威		4	4	2.0	2.0
4	莫世艺		1	2	1.0	1.0
5	梁剑锋		1	2	1.0	1.0