可污染食品及饲料的产黄曲霉毒素真菌的多重PCR检测

• 作者: 冯明光 应盛华 秦文彦 程洁
• 来源期刊: 菌物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黄曲霉毒素 曲霉 青霉 快速检测体系 反应条件优化 特异性 灵敏性
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 448-454
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.5
• 字数: 3424字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6472.2007.03.017

摘要

根据黄曲霉毒素生化途径中的关键调控基因aflR、omt-1和ver-1的序列以及真菌共有的5.8S rDNA的ITS序列分别设计ApaF/ApaR、OmtF/OmtR、VerF/VerR及ITS1/ITS4四对引物,研究建立产黄曲霉毒素真菌及其潜在饲料或食品污染的多重PCR快速灵敏检测体系.PCR扩增的4个DNA片段中,1032bp、797bp和600bp与基因库中对应基因或DNA序列的同源性达99%以上,仅452bp片段与对应基因ver-1的同源性为98%.通过优化主要影响因子,建立了快速检测产黄曲霉毒素真菌的单管多重PCR反应体系,并用于6种曲霉和1种青霉DNA样品的检测.结果显示,上述4个片段均平行地清晰出现在2株黄曲霉Aspergillus flavus和1株寄生曲霉A.parasiticus的DNA样品中,而其余菌种只检测到ITS片段,说明检测特异性很好.灵敏性分析表明,多重PCR检测的保守灵敏度为1ng/μL样品DNA,所有目标片段的条带均很清晰;即使DNA浓度降至0.1ng/μL,除aflR之外的所有条带也可分辨.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯明光	浙江大学微生物研究所	79	1290	21.0	32.0
2	应盛华	浙江大学微生物研究所	15	406	10.0	15.0
3	程洁	浙江出入境检验检疫局技术中心	4	39	3.0	4.0
4	秦文彦	浙江大学微生物研究所	1	14	1.0	1.0