IL-18在毕赤酵母中表达载体的构建及高拷贝子筛选

• 作者: 宋方洲 彭彦 徐丹 王亚平 王勇
• 来源期刊: 江西医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素18 毕赤酵母 菌株
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R34-33
• 字数: 2932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2007.02.005

摘要

目的 探索人白介素18(IL-18)成熟蛋白(mhIL-18)在毕赤酵母中高效表达载体的构建,以及多拷贝阳性转化子的筛选.方法 采用SOEing及不对称PCR方法扩增出mhIL-18基因并构建融合型表达载体pPIC9IL-18-Intein,再运用大片段套接的方法避开酶切位点,构建pPIC9KIL-18-Intein.利用G418的加压筛选寻找重组克隆高拷贝菌株.结果 成功构建pPIC9KIL-18-Intein载体,并通过双抗筛选、PCR、酶切以及DNA 测序证明.寻找到重组克隆高拷贝菌株.结论 成功构建mhIL-18在毕赤酵母中的表达载体pPIC9KIL-18-Intein,并筛选到重组克隆高拷贝菌株,为IL-18融合蛋白的高表达及纯化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	重庆医科大学基础医学院	43	302	8.0	16.0
2	宋方洲	重庆医科大学基础医学院	88	309	9.0	12.0
3	王亚平	重庆医科大学基础医学院	161	1806	23.0	36.0
4	彭彦	重庆医科大学基础医学院	15	97	6.0	9.0
5	徐丹	重庆医科大学附属第一医院神经外科	20	128	7.0	11.0