ERαAF-1区磷酸化位点突变体的构建及对ERα活性的影响

• 作者: 刘雅娟 叶棋浓 宁康 李熔 杨怀宁 杨智洪 范洪学
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,雌激素 反式激活(遗传学) 点突变
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 200-203
• 页数: 4页
• 分类号: R737.9
• 字数: 2941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.02.002

摘要

目的:构建雌激素受体(ERα)AF1区丝氨酸(Ser)磷酸化位点104、106、118和167位氨基酸的4个突变体,并在哺乳动物细胞293T中检测突变后对其活性的影响.方法:以pcDNA3-ERα为模板,用重组PCR的方法扩增出编码这4种突变体的基因片段,再将这些片段以正确相位与peDNA3-FLAG载体中的FLAG编码序列融合.用Western blotting检测融合蛋白的表达,并在哺乳动物细胞293T中检测这些突变体突变后对ERα活性的影响.结果:成功构建了ERα AF1区丝氨酸磷酸化位点104、106、118和167位氨基酸的4个突变体,并在293T细胞中得到表达.活性测定结果表明,在不加雌激素(E2)的情况下,ERα及其突变体的转录活性分别是空载体pcDNA3的3.40、3.21、3.02、3.00和3.54倍;在雌激素的作用下,104、106位氨基酸的突变体对ERα的活性无影响,而118和167位氨基酸的突变体的活性值是ERα的50%.结论:在104、106、118和167这4个ERα AF1区磷酸化位点中,只有118和167位点的丝氨酸的磷酸化是雌激素调节靶基因转录过程中所必需的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范洪学	吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室	57	328	11.0	15.0
2	杨智洪	军事医学科学院生物工程研究所	10	30	3.0	4.0
3	刘雅娟	吉林大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	46	197	8.0	11.0
4	宁康	军事医学科学院生物工程研究所	4	4	1.0	1.0
8	李熔	军事医学科学院生物工程研究所	3	3	1.0	1.0
9	杨怀宁	吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室	1	1	1.0	1.0