EGFP-HBVP22e融合蛋白在HepG2中的表达

• 作者: 何海棠 侯金林 刁志宏 张明霞 朱幼芙 王战会
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 基因重组 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 61-63
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.01.018

摘要

目的 利用pEGFP-C2真核表达载体,建立稳定表达乙型肝炎病毒(HBV)P22e的HepG2细胞系.方法 以含1.2拷贝HBV基因(adr亚型)的p3.8Ⅱ质粒为模板,PCR获得HBVP22e cDNA片段,分离插入通用T载体pMD18-T中鉴定,然后装入真核表达型载体pEGFP-C2中,HBVP22e与EGFP基因融合,脂质体转染HepG2细胞株,荧光显微镜下观察EGFP-HBVP22e融合蛋白的胞内表达,Western blot检测阳性克隆细胞EGFP-HBVP22e的表达.结果 成功构建了真核表达载体pEGFP-C2HBVP22e,并转染HepG2细胞,经多次传代培养鉴定,获得稳定表达EGFP-HBVP22e融合蛋白的HepG2细胞系.结论 该细胞系的建立为进一步研究HBVP22e的生物学功能与乙型肝炎发病机制的关系奠定了基础.