杆状病毒AcMNPV vp39基因的克隆、表达与抗体制备

• 作者: 庞义 李朝飞 李玲玲 陈维春
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 vp39基因 原核表达 抗体
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: Q939.96|S182
• 字数: 2445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.03.003

摘要

目的:构建苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica nucleopolyhedro virus,AcMNPV)VP39的原核表达载体,表达、纯化蛋白并制备多克隆抗体.方法:用PCR方法扩增vp39基因,并将其克隆至pET-21a(+)上,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,采用割胶回收的方法纯化融合蛋白,纯化的融合蛋白作为抗原,免疫新西兰大白兔,Western blot检测抗体活性.结果:构建了pET-VP39原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌经IPTG诱导超量表达了一个与预期理论值相符的约为40 kDa的融合蛋白.对制备的抗体进行免疫印迹分析表明该抗血清能与感染苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒的细胞蛋白样品发生特异性反应.结论:获得了兔抗AcMNPV-VV39多克隆抗体,为进一步深入研究VP39在病毒侵染过程中与宿主因子的相互作用提供了检测工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈维春	广东医学院生化教研室	16	51	5.0	7.0
2	李玲玲	中山大学生物防治国家重点实验室	18	164	6.0	12.0
4	李朝飞	中山大学生物防治国家重点实验室	16	88	6.0	9.0
5	庞义	中山大学生物防治国家重点实验室	96	1022	17.0	28.0